本标准物质为线性校准荧光微球标准物质,主要用于流式细胞仪FITC通道的线性校准、光路校直,灵敏性、稳定性检测,实验室质量控制,评价和检验分析方法,考核人员操作水平。
一、样品制备
本标准物质采用分散聚合制备3.0~3.4μm的单分散聚苯乙烯空白微球,将荧光染料包覆于空白微球内得到5种荧光微球。将其均匀分散于加有少量稳定剂的纯水中配制成悬浮液,在洁净条件下进行分装。本标准物质共6瓶(含1瓶空白微球),每瓶≥1mL,参考浓度为1×107/mL。
二、溯源性及定值方法
本标准物质的粒径采用扫描电子显微镜结合图像分析法进行定值,定值结果可溯源至国家长度基准。荧光强度的定值采用荧光分光光度计,并采用流式细胞仪BD FACSAriaTM Ⅱ进行验证。
三、特性量值及不确定度
本标准物质粒径定值结果:
编号
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数量中值粒径
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数量均值粒径
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不确定度,k=2
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变异系数
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BW036001-036006
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3.2µm
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3.3µm
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4%
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3.7%
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荧光强度定值结果:
编号
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MESF[a]
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BW036002
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4600 ± 200
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BW036003
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14200 ± 600
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BW036004
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44500 ± 1900
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BW036005
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144000 ± 5800
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BW036006
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321000 ± 12700
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[a] 等量可溶性荧光分子。
四、均匀性检验及稳定性考察
根据国家《一级标准物质》技术规范,对该标准物质样品随机抽样进行均匀性和稳定性检验,结果表明标准物质的均匀性、稳定性良好。该标准物质自定值日期起,有效期为1年。
五、包装、储存及使用
本标准物质采用避光塑料瓶包装,冷藏、避光保存,运输时应有冷藏和防碎裂保护。使用前要将样品充分分散均匀,滴加至PBS缓冲液中,混匀后使用。
六、 安全警示
本标准物质中含少量防腐剂,切勿入口。